塞內(nèi)加谷病毒3C蛋白生物信息學分析及真核質(zhì)粒構(gòu)建表達
摘要：3C蛋白是塞內(nèi)加谷病毒重要的非結(jié)構(gòu)蛋白之一,在病毒入侵機制及影響宿主抗病毒天然免疫方面發(fā)揮重要作用。試驗應(yīng)用Oligo 7.0和Primer 6.0軟件,用BLAST對比SVV世界參考株,設(shè)計一對特異性引物。以SVV-SN株病毒液抽提RNA為模板,將序列連接pMD19-T載體后測序,對正確片段作生物信息學分析可知SVV 3C可編碼一個較穩(wěn)定非分泌型蛋白,具有一個保守“催化三聯(lián)體”。預(yù)測發(fā)現(xiàn)該蛋白具有16個磷酸化位點,證明其較高活性,預(yù)測其二級結(jié)構(gòu)后得到再次證實。將pMD19-SVV-3C和真核表達載體pcDNA3.1(+)雙酶切后連接,重組質(zhì)粒經(jīng)鑒定后命名為pcDNA3.1(+)-SVV-3C。將pcDNA3.1(+)-SVV-3C轉(zhuǎn)染到BHK-21細胞24 h后制樣作Western blotting,成功驗證該重組質(zhì)粒可在BHK-21中真核表達。相比其他同科病毒,當前SVV 3C蛋白研究存在空白。文章旨在為進一步研究SVV 3C蛋白結(jié)構(gòu)提供理論依據(jù),為后續(xù)探索SVV 3C蛋白對于宿主作用機制奠定基礎(chǔ)。
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東北農(nóng)業(yè)大學學報雜志， 月刊，本刊重視學術(shù)導(dǎo)向，堅持科學性、學術(shù)性、先進性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：作物科學、園藝科學、農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境、生命科學、動物科學、動物醫(yī)學、農(nóng)業(yè)工程與技術(shù)、綜述、科技進展等等。于1957年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。
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