基于單個(gè)B細(xì)胞抗O型口蹄疫病毒單克隆抗體的研制
作者：張雨; 秦曉東; 朱學(xué)亮; 殷相平; 李彥敏; 張志東 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 甘肅蘭州730046
摘要：為了建立基于單個(gè)B細(xì)胞制備抗體技術(shù),本研究以O(shè)型滅活FMDV為抗原,采集健康C57/BL小鼠脾細(xì)胞,經(jīng)過磁珠富集、流式B220+/CD38+/Ig G1+/抗原+分選,獲得單個(gè)抗原特異性的B細(xì)胞。經(jīng)單細(xì)胞巢式PCR反應(yīng)擴(kuò)增獲得抗體完整輕、重鏈可變區(qū)序列后,分別構(gòu)建輕/重鏈表達(dá)質(zhì)粒,然后共轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞后,成功獲得3株特異性單克隆抗體,且證明均屬于Ig G1型抗體;ELISA結(jié)果顯示,獲得的3株抗體均能與O型FMDV抗原結(jié)合;免疫熒光試驗(yàn)證明,3株抗體能夠特異性結(jié)合細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的O型FMDV。本研究成功建立了基于單個(gè)B細(xì)胞直接制備抗FMDV單抗的方法,為后期開發(fā)特異性單克隆抗體打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
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中國獸醫(yī)科學(xué)雜志
中國獸醫(yī)科學(xué)雜志， 月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)、基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)、研究進(jìn)展評述等等。于1971年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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