黃色瘤胃球菌纖維小體腳手架蛋白ScaC基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達
摘要：為獲得纖維小體(cellulosome)的基本元件,本試驗以灘羊瘤胃液微生物混合DNA為模板,根據(jù)黃色瘤胃球菌纖維小體的腳手架蛋白ScaC基因序列(GenBank登錄號:JN109634.1)設(shè)計特異性引物,擴增纖維小體腳手架蛋白基因,并對其進行克隆、測序及核苷酸和氨基酸序列分析;同時構(gòu)建腳手架蛋白基因原核表達載體,分析其在大腸桿菌中的表達情況。結(jié)果顯示,試驗利用1對引物同時成功克隆獲得2個腳手架蛋白編碼基因,其中一個基因全長867bp,編碼288個氨基酸,命名為ScaC2基因;另一個基因全長870bp,編碼289個氨基酸,命名為ScaC7基因。核苷酸序列分析表明,腳手架蛋白基因ScaC2與ScaC7的核苷酸序列相似性為74.1%,ScaC2基因與黃色瘤胃球菌AGY80P318及ScaC7基因與黃色瘤胃球菌DA640P037ScaC基因核苷酸序列相似性均為99%;氨基酸保守序列分析顯示,ScaC2和ScaC7氨基酸序列均具有典型的腳手架蛋白結(jié)構(gòu)域,含有1個Ⅰ型黏附域和1個Ⅰ型錨定域。蛋白表達分析顯示,ScaC2和ScaC7基因均能在大腸桿菌中實現(xiàn)可溶性表達,表達產(chǎn)物大小約為33ku。本試驗克隆獲得的纖維小體的腳手架蛋白基因ScaC2和ScaC7可為后續(xù)人工纖維小體的構(gòu)建提供基本材料。
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中國畜牧獸醫(yī)雜志
中國畜牧獸醫(yī)雜志， 月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：生物技術(shù)、生理生化、動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)、遺傳繁育、預(yù)防獸醫(yī)、基礎(chǔ)獸醫(yī)等。于1974年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。
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